白介素2Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理： 本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中羊白細(xì)胞介素2（IL-2）水平。用純化的羊白細(xì)胞介素2（IL-2）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素2（IL-2），再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素2（IL-2）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素2（IL-2）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中羊白細(xì)胞介素2（IL-2）濃度。
白介素2Elisa試劑盒注意事項(xiàng)：
1.當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。
2.洗滌過(guò)程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。
3.一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，做復(fù)孔。
5.如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。
6.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
7.底物請(qǐng)避光保存。
8.不要用其它生產(chǎn)廠(chǎng)家的試劑替換試劑盒中的試劑。
白介素2Elisa試劑盒標(biāo)本處理辦法：
實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mo/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
若所檢樣本不包含在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性,并注意留存樣本。
若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類(lèi)樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測(cè)不出的情況。
使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引|入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。
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