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Masson 三色染色試劑盒染色原理方法

更新時間:2017-05-16 點擊量:1059

Masson 三色染色試劑盒染色原理方法

結締組織狹義上是指其含有的三種纖維:膠原纖維、網狀纖維、彈力纖維、而膠原纖維(collagen fiber)是分布zui廣、含量zui多的一種纖維。
Masson三色染色是結締組織染色中zui經典的一種方法,是顯示組織中纖維的主要方法之一,是膠原纖維染色而經典的技術方法。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關,分子的大小由分子量來體現,小分子量易穿透結構致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進入結構疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍的分子量都很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色或藍色,主要用于區分膠原纖維和肌纖維。 
Masson 三色染色試劑盒主要成份: 
1.weigert鐵蘇木素A液 
2.weigert鐵蘇木素B液 
3.麗春紅酸性品紅染液 
4.磷鉬酸溶液 
5.苯胺藍溶液
樣本要求: 組織片充分固定和脫蠟。 
Masson 三色染色試劑盒染色方法: 
1.組織固定于bouin氏液或zenker氏液,流水沖洗過夜,常規脫水包埋 
2.切片脫蠟至水 
3.weigert鐵蘇木素(weigert鐵蘇木素A、B液等比例混和)染5-10分,流水稍洗
4. 1%鹽酸酒精分化,流水沖洗數分 
5. 麗春紅酸性品紅染液染5-10分,流水稍沖洗。 
6.磷鉬酸溶液處理約5分鐘,不用水洗,直接用苯胺藍人染液復染5分鐘 
7. 1%冰醋酸處理1分鐘,95%酒精脫水多次。.*脫水、二甲苯透明,中性樹膠封固。
Masson 三色染色檢驗結果:
膠原纖維、粘液、軟骨呈藍色,肌纖維、纖維素和紅細胞染紅色、胞核染藍黑色。、
注意事項: 
1.weigert鐵蘇木素分A、B兩液,應與臨用前將兩液等分混合,而不宜預先混合,否則容易氧化沉淀而逐漸失去染色能力。 
2.組織用bouin氏液或zenker氏液固定為佳,如已用10%甲醛液固定,切片可在脫蠟至水后,再放入bouin氏液作用一晚或置37℃溫箱內1-2小時,然后流水沖洗切片至黃色消失再進行染色。 
3.磷鉬酸處理時,要鏡下控制,見肌纖維呈紅色,膠原纖維呈淡紅色即可。
Masson 三色染色試劑盒,貨號為G1340,常賣規格為7*50ml和7*100ml兩種。主要用于膠原纖維和肌纖維的鑒別染色。 由mallory三色染色改造,利用兩種或三種陰離子染料混合一起或先后作用完成染色,與陰離子染料分子大小和組織的滲透性有關。根據組織不同的滲透性能,選擇分子大小不同的陰離子的染料進行染色,便可把不同組織成份顯示出來。
 

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